技術文章
更新時間:2025-10-11
點擊次數:86
趨化實驗:優先選無動物源、低內毒素重組蛋白,濃度梯度 1–100 ng/mL 即可觀測中性粒細胞遷移。
ELISA/Luminex:需要高親和捕獲抗體與檢測抗體配對,注意與 CXCL1/2 交叉反應率 <0.5 %。
IHC/IF:組織切片里 CXCL3 表達弱,選高敏兔單克隆,抗原表位靠近 C 端 α 螺旋,避免 N 端易降解區。
E.coli:產量高、成本低,售價 100 μg 約 800–1200 元;無糖基化,活性與天然差異肉眼難辨,適合體外趨化。
HEK293:真核糖基化,血清半衰期長 1.8 倍,售價翻倍;做小鼠體內炎癥模型更穩,預算充足再考慮。
無動物源 CHO:臨床前安全性報告可直接引用,每 100 μg 報價 3000+,適合申報 IND 階段。
His 標簽:純化得率高,鎳柱一步搞定;做晶體或 NMR 需切標簽,額外花費凝血酶 200 U 成本。
Tag-free:Native 序列,體內實驗更可信;純化步驟多 2 步,廠家會把成本轉嫁給用戶,溢價 30 %。
看 EC50 而不是廣告頁寫的“bioactivity"。
用經典 Transwell 法:中性粒細胞 5×10? / 孔,上腔 300 μL,下腔 600 μL,37 ℃ 1 h,EC50 應在 5–15 ng/mL。
若廠家只寫“active"而無數值,要求 COA(Certificate of Analysis),不提供直接淘汰。
常規 10 μg、50 μg、100 μg 三檔。
做劑量響應曲線選 10 μg×5 支獨立包裝,避免反復凍融;做動物模型直接買 500 μg 大包裝,單價降 25 %。
自帶分裝管優于整管,每管 20 μL 預分,減少實驗室手套污染概率。
凍干:常溫運輸,收到后 4 ℃保存 24 個月;復溶后一次性用完最佳,剩余液體液氮速凍可再撐 2 周。
液體:–80 ℃干冰運輸,運費 200 元起;到貨直接放–80 ℃,活性無損失,適合沒凍干設備的實驗室。
要求提供 SDS-PAGE、SEC-HPLC、內毒素、生物活性四張圖,缺一張就換供應商。
批次號與庫存管身激光雕刻一致,拍照留檔;發文章時審稿人會查。
問清是否 24 h 內響應技術郵件;CXCL3 做 ELISA 出現高背景,廠家能遠程協助優化封閉液配方。
承諾活性問題 7 天包換,來回運費賣方承擔,寫進采購合同。
| 品牌 | 表達系統 | 規格 | 報價 | 活性 EC50 | 推薦指數 |
|---|---|---|---|---|---|
| A | E.coli | 50 μg | 1100 元 | 8 ng/mL | ★★★★☆ |
| B | HEK293 | 50 μg | 2300 元 | 6 ng/mL | ★★★★★ |
| C | CHO | 50 μg | 3200 元 | 7 ng/mL | ★★★☆☆ |
[ ] 確認序列與 UniProt P19876 一致,無額外 N 端 Met
[ ] 內毒素 ≤0.1 EU/μg
[ ] 提供生物活性 EC50 具體數值與檢測方法
[ ] 包裝支持分裝,標簽可選
[ ] 售后條款寫進合同