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更新時間:2025-10-30
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山羊抗大鼠 IgG 多克隆,抗原采用 Sprague-Dawley 大鼠血清完整 IgG,親和層析后流穿液再跑 SDS-PAGE,只剩 IgG 重鏈 γ 與輕鏈 κ/λ,無白蛋白條帶。證書里“H+L"代表重鏈+輕鏈雙識別,做還原電泳時 55 kDa 與 25 kDa 同時顯影,避免只抓重鏈導(dǎo)致的信號丟失。
HRP 版本酶:抗體摩爾比 3.2:1,過高會聚集,過低靈敏度打折。廠家 COA 里寫“3–4"是合格區(qū)間,拿到手自己測 A403/A280,比值 0.45–0.55 對應(yīng) 3 個 HRP,超出 0.6 說明偶聯(lián)過度,WB 背景容易起霧。
參數(shù)表一行“Rat IgG-specific, mouse/human adsorbed"背后有具體數(shù)字:ELISA 檢測小鼠 IgG 交叉 OD 0.028,人 IgG 0.031,均 <0.05。做多色流式時,同一樣本含人 CD3 小鼠 CD4 大鼠 CD8,三抗互不干擾,補償矩陣省一半時間。
標(biāo)稱 1 mg/mL,實測 0.92–1.08 mg/mL 屬出廠允許漂移。做定量 ELISA 二抗夾心法時,把 ug 換算成真實值,直接代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,可把批間 CV 從 12 % 壓到 5 %。體積誤差同樣關(guān)鍵,0.5 mL 包裝實際 520 µL,多出的 4 % 在預(yù)分裝 96 孔板時能多鋪 2 列,避免邊緣孔空跑。
SPR 實測 KD 2.1 nM,Kon 1.9×10? 1/Ms,Koff 4.0×10?? 1/s。Koff 慢意味著 37 °C 孵育 30 min 即可達(dá)到平臺,無需過夜。縮短時間把非特異結(jié)合窗口壓縮,高豐度蛋白背景下降 30 %。
Alexa Fluor 647 版本量子產(chǎn)率 0.33,比 Cy5 高 10 %,但怕甘油。封片劑甘油濃度 >80 % 時亮度衰減 15 %,改用 70 % 甘油 + 0.5 % n-propyl gallate,熒光信號 4 °C 保存 7 天仍維持 95 %。
液體 4 °C 放 12 個月,活性降 8 %;凍干復(fù)溶后 4 °C 放 6 個月,降 5 %。凍干過程蔗糖:抗體質(zhì)量比 1:1 做保護劑,復(fù)溶用水化液 0.9 % NaCl+0.02 % Tween-20,氣泡少,聚集度 <3 %。
A23440-240512 表示 2024 年 5 月第 12 批,后綴 240512B 為次級亞批,B 代表二次層析柱。文章投稿時把批次寫進(jìn)方法段,審稿人追問重現(xiàn)性,可直接調(diào)取廠方留樣,Western 條帶灰度差異 <3 %,滿足編輯部要求。
夏天 37 °C 運輸 48 h,抗體活性不受影響,前提是包裝箱內(nèi)置相變冰板 4 片,保持 2–8 °C 區(qū)間 36 h。收貨立刻測溫度貼紙,超標(biāo)到 25 °C 以上可在 7 天內(nèi)申請免費換新,超 30 °C 廠家直接報廢處理,避免用戶承擔(dān)風(fēng)險。
拿到 COA 先掃 5 行:濃度、摩爾比、交叉 OD、KD、無菌。任意一項空白,要求補發(fā)完整報告,再決定是否簽收。把這份 PDF 重命名為“貨號-批次-入庫日期",存在本地云端,三年后追溯數(shù)據(jù)依舊秒查。
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