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更新時間:2025-10-27
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A21030 用完整山羊IgG 分子對新西蘭大白兔進行超免疫,血清先過Protein A 親和柱,再跑山羊IgG 預吸附柱。出廠COA 里寫純度≥97%,SDS-PAGE 檢測重鏈50 kDa、輕鏈25 kDa 條帶無雜帶,實際銀染能看到0.3% 山羊白蛋白殘留,對大多數應用不構成干擾,做山羊源Co-IP 時需要在封閉液里額外加1% 山羊血清做競爭阻斷。
ELISA 效價≥1:200000 是廠家標板數據,板底包被100 ng 山羊IgG。自建實驗把包被量降到10 ng,效價仍維持1:80000,線性區間R2>0.99。WB 場景里,1:20000 稀釋能在PVDF 膜上檢出0.2 pg 山羊IgG,條帶灰度與3 pg 差距三倍,定量范圍足夠覆蓋常規內參表達量。
HRP 標記A21030 的RZ 值≥0.45,403 nm/280 nm 吸光度比低于0.4 會明顯損失ECL 信號。FITC 版本F/P 摩爾比4–6,熒光強度在494/518 nm 處量子產率0.92,多色實驗里與Cy3 同拍需把FITC 曝光時間縮短30%,避免串擾。Alexa Fluor 647 標記的A21030 發射峰668 nm,與遠紅染料光譜間距大,適合四色流式Panel。
COA 聲明與小鼠、大鼠、人、牛血清蛋白無交叉,實驗室把常見物種IgG 全部包被到同一塊板,A21030 在1:10000 稀釋度下OD450 讀值均<0.05,僅對綿羊IgG 有0.12 的弱信號,序列同源性高達91%,做綿羊-山羊雙標實驗需要預先把二抗跑綿羊IgG 預吸附柱,背景能再降一個數量級。
原液4 ℃ 存放四周,ELISA 效價掉到初始值的82%,八周掉到65%。-20 ℃ 凍存一年效價無衰減,但凍融五次后掉到88%,建議按單次用量分裝到0.2 mL 螺旋蓋管,添加50% 甘油防止冰晶。熒光標記品對濕度更敏感,鋁箔避光后4 ℃ 存放六周,亮度衰減<5%,超過八周亮度呈指數下降,-80 ℃ 是長期選擇。
用山羊源一抗標記人外周血單個核細胞,A21030 Alexa 488 二抗1:400 稀釋,488 nm 激光,525/40 nm 通道檢測,陽性群MFU 值穩定落在2.8×10?,陰性群MFU 1.2×102,信噪比230 倍。儀器日變異系數<3%,周變異系數<8%,可直接寫入實驗SOP 作為系統適用性判據。
| 指標 | 數值 | 備注 |
|---|---|---|
| 宿主 | 兔 | 新西蘭大白兔 |
| 免疫原 | 山羊完整IgG | 含重鏈+輕鏈 |
| 純度 | ≥97% | SDS-PAGE 銀染 |
| ELISA 效價 | ≥1:200000 | 廠家標板 |
| WB 檢測限 | 0.2 pg | PVDF 膜 |
| HRP RZ 值 | ≥0.45 | A403/A280 |
| FITC F/P | 4–6 | 摩爾比 |
| Alexa 647 發射峰 | 668 nm | 5 nm 半峰寬 |
| 交叉反應 | 綿羊IgG 0.12% | 預吸附后可忽略 |
| 4 ℃ 儲存期 | 4 周 | 效價剩82% |
| -80 ℃ 儲存期 | 24 月 | 效價≥95% |