一、核心差異來源及影響

 

1.小鼠品系差異（最關(guān)鍵因素之一）

 

不同近交系、遠(yuǎn)交系或基因修飾小鼠的遺傳背景完全不同，導(dǎo)致血清中蛋白質(zhì)組成、激素水平、免疫分子（如抗體、細(xì)胞因子）存在固有差異。

 

近交系小鼠（如C57BL/6、BALB/c、C3H）：遺傳背景均一，同一品系不同個(gè)體的血清成分穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，是科研中常用的血清來源。但不同品系間差異明顯：

 

例：C57BL/6小鼠血清中某些補(bǔ)體成分（如C3）含量與BALB/c不同；BALB/c小鼠對特定抗原的抗體基線水平可能更低，適合免疫相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

 

遠(yuǎn)交系小鼠（如ICR、CD-1）：遺傳背景異質(zhì)，個(gè)體間血清成分波動較大，重復(fù)性差，僅適用于對均一性要求低的實(shí)驗(yàn)（如初步毒性篩選）。

 

基因修飾小鼠（如敲除/敲入小鼠）：即使背景品系相同，目的基因的改造可能影響肝臟合成的血清蛋白（如白蛋白、凝血因子）或免疫分子，此類血清需特別標(biāo)注，不可替代野生型血清。

 

2.飼養(yǎng)環(huán)境與營養(yǎng)差異

 

即使同一品系，飼養(yǎng)條件（飼料、水質(zhì)、溫度、光照）會影響小鼠的代謝和血清成分：

 

飼料營養(yǎng)：高蛋白飼料可能提高血清中總蛋白含量；缺乏某些維生素（如維生素A、D）會導(dǎo)致血清中對應(yīng)維生素水平下降，影響依賴這些營養(yǎng)素的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)（如上皮細(xì)胞分化）。

 

環(huán)境應(yīng)激：飼養(yǎng)密度過高、噪音或頻繁操作會使小鼠產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致血清中皮質(zhì)酮（應(yīng)激激素）升高，可能抑制免疫細(xì)胞活性或影響細(xì)胞增殖。

 

3.血清制備工藝差異

 

血清的采集、分離、處理流程不同，會影響其純度、活性及穩(wěn)定性：

 

采集方式：心臟采血vs眼眶采血對血清成分影響較小，但反復(fù)采血（多次少量）可能導(dǎo)致小鼠貧血，血清中血紅蛋白含量升高（影響血清顏色和純度）。

 

分離與純化：離心速度（通常3000-4000rpm）、溫度（4℃冷藏分離vs室溫分離）會影響血清中蛋白質(zhì)的變性程度；是否經(jīng)過“熱滅活”（56℃30分鐘）也會改變成分——熱滅活可去除補(bǔ)體活性（避免干擾免疫實(shí)驗(yàn)或細(xì)胞毒性），但會導(dǎo)致部分生長因子失活（不適合促細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)）。

 

儲存條件：-20℃冷凍保存vs4℃短期保存，長期反復(fù)凍融會導(dǎo)致血清中蛋白質(zhì)沉淀，降低活性。

 

二、實(shí)驗(yàn)中的具體影響案例

 

細(xì)胞培養(yǎng)：用老年小鼠血清培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞，可能因生長因子不足導(dǎo)致增殖速度減慢；用普通級小鼠血清培養(yǎng)免疫細(xì)胞，可能因隱性感染的抗體干擾細(xì)胞活化檢測。

 

免疫實(shí)驗(yàn)：用雌性小鼠血清（發(fā)情期）做ELISA檢測雌激素相關(guān)指標(biāo)，會因內(nèi)源性雌激素干擾導(dǎo)致結(jié)果假陽性；用不同品系小鼠血清作為“陰性對照”，可能因固有抗體差異導(dǎo)致背景值不同。

 

動物模型：給BALB/c小鼠注射C57BL/6小鼠的血清，可能因品系間主要組織相容性復(fù)合體（MHC）不同引發(fā)免疫排斥反應(yīng)，干擾移植模型實(shí)驗(yàn)。

 

三、實(shí)驗(yàn)選擇建議

 

為減少差異干擾，實(shí)驗(yàn)中需遵循“同源、同條件、標(biāo)準(zhǔn)化”原則：

 

優(yōu)先選擇SPF級近交系小鼠的血清，確保遺傳和健康背景均一；

 

明確標(biāo)注血清來源的品系、年齡、性別、飼養(yǎng)級別，并與實(shí)驗(yàn)動物的背景匹配（如用C57BL/6小鼠做模型，就用同品系血清）；

 

統(tǒng)一血清的制備和儲存工藝（如是否熱滅活、凍存條件），避免批次間差異；

 

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)中，建議對血清進(jìn)行預(yù)篩選（如檢測目標(biāo)成分含量、細(xì)胞增殖活性），確保符合實(shí)驗(yàn)需求。