把活性、純度、內毒素、批間差全部量化，實驗失敗再也不用甩鍋給“細胞狀態"

定量活性：ED50 20–50 ng/mL 的 SH-SY5Y 存活模型

行業標準用 RET 依賴的 SH-SY5Y 細胞，無血清起始密度 1×10?/100 µL，48 h 后 CCK-8 讀值。ED50 落在 20–50 ng/mL 為合格，曲線四參數擬合 R2≥0.995。斜率<0.85 提示蛋白有聚集體，RET 二聚化受阻，活性虛高。收貨先跑一遍 8 點梯度，ED50 跑出 70 ng/mL 直接退貨。

純度雙證：SDS-PAGE ≥97% + SEC-MALS 聚體 ≤3%

SDS-PAGE 單一條帶只是門票，SEC-MALS 才能說明有沒有二聚體。聚體>3% 時，RET 信號被稀釋，原代中腦神經元 7 天存活率掉到 80%。申報 IND 時，MALS 原始圖譜必須附在模塊 3，缺圖就發補。實驗前自己再跑一遍 Superdex 200，5 分鐘決定用還是扔。

內毒素 0.05 EU/mg：多巴胺神經元比巨噬細胞更敏感

原代多巴胺神經元對 LPS 閾值 0.01 EU/mL，GDNF 工作濃度 10 ng/mL，換算后內毒素≤0.05 EU/mg 才能把背景凋亡壓到 5% 以下。高于 0.1 EU/mg，TH+ 細胞 72 h 存活率掉 15%，電生理記錄自發放電頻率亂套。索要 LAL 實測值，報告寫“<0.05 EU/mg"卻給不出數字，按 0.049 EU/mg 算體積，再評估極限用量。

糖基化位點：CHO N-鏈接 2 位點 vs E.coli 無糖基

CHO 版本在天冬酰胺 126、226 位帶 N-糖，體內半衰期 4.2 h，動物實驗更友好。E.coli 無糖基，晶體學結構解析不含柔性糖鏈，分辨率能到 1.8 ?。細胞實驗選 CHO，做 X-ray 選 E.coli，別讓糖鏈差異成為數據噪點。下單前在備注欄寫明“CHO 糖基化"或“E.coli 無糖基"，合同、COA、瓶子標簽三處必須一致，防止混發。

批間差 ≤5%：RET 磷酸化比值說了算

批次差異主要來自蛋白折疊中間體。廠家用 20 L 灌流發酵，溶氧>40%，把不全折疊體壓到 2%。用戶驗收時抽三批，統一用 30 ng/mL 刺激 SH-SY5Y，RET-Y1062 磷酸化比值批間 CV≤5%。>6% 的批次直接退貨，避免免疫印跡條帶灰度來回跑。

穩定性窗口：?70 ℃ 24 個月 vs 37 ℃ 7 天

蛋白在 ?70 ℃ 24 個月活性無漂移，37 ℃ 7 天加速損失 8%。夏季運輸車廂 45 ℃ 持續 6 h，活性掉到 92%，對應 3 天失效風險<2%。收貨先掃二維碼查加速報告，缺失 37 ℃ 數據的批次直接拍照留證，售后索賠有憑據。

分裝凍融：5 次循環后活性 93%±2%

GDNF 對冰晶敏感，第 6 次凍融活性掉到 85%。廠家加 8% 海藻糖 + 0.02% Tween-80，能把 5 次循環損失壓到 7%。實驗室收到 500 µg 大包裝，按 20 µL/管分裝，液氮氣相保存，一次取用避免反復，實測活性與標稱值偏差<5%。

平臺遷移系數：ELISA→MSD→AlphaLISA

MSD 電化學發光靈敏度比 ELISA 高 5 倍，同一樣本讀值×0.20 對齊 ELISA 標尺。AlphaLISA 受血清基質干擾小，讀值×0.18。做多平臺對比時，先把濃度歸一到 ELISA 當量，再畫柱狀圖，審稿人不會質疑量綱不一致。