細胞特性與應用

永生化小鼠遠端小管 KDT3 細胞是研究腎臟功能和藥物代謝的有力工具，具備無限增殖能力，可用于腎臟疾病機制探索、毒性評估及藥物篩選。

培養基配制

推薦使用 DMEM 或 RPMI-1640 培養基，添加 10% 胎牛血清、1% 青霉素 - 鏈霉素溶液，根據需求可補充 1% 地塞米松，調節 pH 至 7.2 - 7.4。

細胞復蘇

從液氮中取出凍存管，37℃水浴快速解凍，轉移至含 9 ml 預熱培養基的離心管，1000 rpm 離心 5 分鐘，棄上清，重懸細胞后接種至培養容器，置于 37℃、5% CO? 培養箱靜置培養。

傳代操作

細胞生長至 80% - 90% 匯合時傳代。用 PBS 洗滌，0.25% 胰蛋白酶 - 0.02% EDTA 消化 1 - 2 分鐘，顯微鏡下觀察細胞脫落情況，加入含血清培養基終止消化，吹打制成細胞懸液，按 1:2 - 1:3 比例分裝至新容器，加入新鮮培養基繼續培養。

細胞凍存

取生長良好的細胞，胰蛋白酶消化制成懸液，與含 10% DMSO 的胎牛血清按 5×10? - 1×10? cells/ml 混合，分裝至凍存管，程序降溫盒 -80℃過夜后轉移至液氮罐保存。

常見問題解決

細胞污染

污染來源多樣，預防措施包括使用無菌試劑、超凈工作臺操作、定期換液觀察。污染發生時需立即停止培養，更換新細胞。

生長緩慢

可能因培養基營養不足或環境不穩定導致。檢查培養基成分新鮮度與配比，確保培養箱溫濕度、CO? 濃度穩定。

形態異常

或與消化過度、培養環境變化相關。優化消化時間，避免損傷；穩定培養條件，減少環境波動。